不同免疫學方法對乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測結果影響

不同免疫學方法對乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測結果影響    

周清 貴州省六盤水市人民醫院 553000

【摘要】 目的 分析不同免疫學方法對乙肝病毒感染血清學標志物檢測結果影響。方法 于2020年1月-2020年4月開展研究，將于本院實施乙肝病毒感染血清學標志物-乙肝兩對半檢測的10304例患者納入研究。對其臨床資料進行回顧性分析，將實施酶聯免疫吸附試驗測定法（ELISA）檢測的5152例患者納入A組，將實施化學發光免疫分析法（CLIA）檢測的5152例患者納入B組。對兩組乙肝兩對半檢測結果進行分析。結果 B組HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc陽性檢出率均高于A組（P<0.05）。B組對乙肝病毒感染診斷準確率高于A組（P<0.05）。結論 乙肝病毒感染血清學標志物檢測中，應用CLIA法檢驗，對臨床指標的檢出價值更高，可提升疾病診斷準確率，為臨床診療提供科學依據。

【關鍵詞】 乙肝病毒感染；血清學標志物；ELISA；CLIA

乙型肝炎屬于比較常見的消化系統病變，乙肝病毒感染是其主要發病誘因。對于乙型肝炎患者來說，疾病進一步發展，不僅導致肝臟功能受損，還會累及全身多器官、系統，甚至引發全身性病變。乙型肝炎目前在我國乃至全世界范圍內都有較高的發病率，影響極大。因此，有效檢出疾病并控制疾病進展，避免出現肝硬化、肝癌等嚴重后果，是全世界醫學領域努力的目標^[1]。乙型肝炎發病群體比較廣泛，且傳染性高，是影響社會公共衛生安全的重大疾病。目前，乙型肝炎的臨床檢查中，以乙肝兩對半檢測為主要檢查方式，可通過對乙型肝炎患者血液中是否攜帶乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗體（抗-HBs）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗體（抗-HBe）、乙肝核心抗體（抗-HBc）等乙肝病毒感染血清學標志物，并通過其不同組合對患者乙肝病毒感染情況及預后進行評估^[2]。在乙肝病毒感染血清學標志物的臨床檢測中，ELISA及CLIA都是常用的免疫檢測方法，本次研究這兩種免疫檢測方法在乙肝病毒感染血清標志物檢查中的應用效果進行分析，為臨床研究提供循證證據。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2020年1月-2020年4月收治的于本院實施乙肝病毒感染血清學標志物檢測的10304例患者納入研究。將實施酶聯免疫吸附試驗測定法（ELISA）檢測的5152例患者納入A組，將實施化學發光免疫分析法（CLIA）檢測的5152例患者納入B組。A組，男2661例，女2491例，年齡20-72歲，平均（32.0±6.2）歲，病程1-10年，平均（5.2±2.1）年；B組，男2661例，女2491例，年齡20-72歲，平均（32.7±5.7）歲，病程1-10年，平均（5.6±1.3）年，研究經醫院倫理委員會批準。納入標準：確診的乙肝病毒感染患者均符合《2015年慢性乙型病毒性肝炎防治指南》中的診斷標準；均經病理診斷確診；患者及家屬對本次研究知情同意；分組資料，具有同質性（P>0.05）。

1.2 方法

A組采用ELISA法開展乙肝病毒感染血清標志物檢測，檢測指標包括乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）、乙型肝炎病毒 e 抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒 e 抗體（HBeAb）、乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb），獲取空腹狀態下外周靜脈血，不能及時送檢的樣本置于4℃專用冰箱中保存。將標本進行離心處理，速度為3500r/min，離心10min。血清分離后，采用ELISA法檢驗。儀器為美國BioTek ELX-808型酶標儀及英料新創(夏門)科技股份有限公司試劑盒進行檢測。檢測過程中，注意嚴格按照規范化的操作步驟及說明書內容操作。

B組采用CLIA法檢測，獲取空腹狀態下外周靜脈血，不能及時送檢的樣本置于4℃專用冰箱中保存。常規以3500r/min離心10min分離血清后，采用CLIA法檢測乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）、乙型肝炎病毒 e 抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒 e 抗體（HBeAb）、乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb），檢測儀器為邁克醫療電子有限公司生產i3000全自動化學發光免疫分析儀進行檢測，試劑盒為邁克生物股份有限公司生產的配套試劑。根據標準檢驗流程及說明書內容開展臨床檢測。

1.3 觀察指標

對兩組乙肝病毒感染血清學標志物陽性檢出率進行對比；統計兩種不同免疫檢測方法對乙肝病毒感染的檢出價值 ^[3]。

1.4 統計學分析

以SPSS 20.0軟件對比數據。以n（%）表示計數數據，檢驗值為X²；以（±s）表示計量數據，檢驗值為t。P<0.05，對比有統計學差異。

2 結果

2.1 乙肝病毒感染血清學標志物陽性檢出率對比

B組HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc陽性檢出率均高于A組（P<0.05）。見表1。

表 1 兩組乙肝病毒感染血清學標志物陽性檢出率對比[n(%)]

2.2 兩種不同免疫檢測方法對乙肝病毒感染的檢出準確率對比

B組對乙肝病毒感染診斷準確率高于A組（P<0.05）。見表2。

表 2 兩種不同免疫檢測方法對乙肝病毒感染的檢出準確率對比[n(%)]

3 討論

乙型病毒性肝炎屬于一種常見的傳染性疾病，是由于乙型肝炎病毒感染導致的肝臟炎性病變，可引發肝臟持續性損傷，引發不良預后。乙型肝炎病毒感染以上腹部不適及惡心嘔吐、食欲不振等為主要發病癥狀，不及時治療將影響患者的生命健康安全。

乙型肝炎病毒（HBV）在分類上歸屬于嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒屬。HBV感染的臨床表現呈多樣性，可表現為無癥狀HBV攜帶者、急性肝炎、慢性肝炎及重癥肝炎，HBV的致病機制迄今尚未完全清楚，大量的研究結果表明，免疫病理反應以及病毒與宿主細胞間的相互作用是肝細胞損傷的主要原因。HBV侵入機體后，首先感染以肝細胞為主的多種細胞，在細胞內復制產生完整的病毒顆粒并分泌HBsAg、HBeAg和HBcAg等抗原成分。在血液或肝細胞膜上的病毒抗原成分為可誘導機體產生特異性的體液免疫和細胞免疫應答。免疫反應的強弱與臨床過程的輕重及轉歸有密切關系。經臨床研究顯示^[4]，我國乙型肝炎發病率占全世界發病率的75%左右，且約有30%左右的病例有進展為肝硬化或者肝癌的風險，由此可見，乙型肝炎對人類生命健康安全的影響較大。

乙型肝炎的診斷依賴血清學標志物檢測，乙肝五項為常規檢查方式，也就是俗稱的乙肝兩對半^[5]。HBsAg是反映是否存在乙肝病毒感染的最主要的指標，健康人應為陰性，陽性表示感染了乙肝病毒。HBsAb是HBV的特異性中和抗體，見于乙性肝炎恢復期、既往HBV感染者或接種HBV疫苗后?？?HBs的出現表示機體對乙型肝炎有免疫力。HBeAg檢測陽性，證實患者體內乙肝病毒復制活躍，傳染性強，如轉為陰性，表示病毒停止復制。HBeAb表示乙肝病毒復制能力減弱，傳染性降低；或乙肝病毒發生基因突變，無法產生e抗原，但乙肝病毒復制活動其實更加活躍^[6]。HBcAb檢測結果陽性表示正感染乙肝病毒或過去曾感染過乙肝病毒。本次采取不同免疫方法進行乙肝病毒感染血清學標志物檢測，研究結果顯示，B組HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc陽性檢出率均高于A組（P<0.05）。B組對乙肝病毒感染診斷準確率高于A組（P<0.05）。這一研究結果，說明采用CLIA技術檢測乙肝病毒感染，檢出陽性率較高，對疾病的準確檢出循證依據。CLIA及ELISA都是臨床常用的檢驗乙型肝炎病毒的有效檢測方法。其中，酶聯免疫法又稱為固相酶聯免疫測定法， 是通過化學反應連接檢測對象和酶， 檢測對象和固相載體上的抗原經免疫反應結合，再加入底物，進行顯色。通過對比顏色的深淺，判斷抗體的水平。 ELISA免疫檢測方法是傳統檢驗方法，具有靈敏度高、 特異性強、 檢測費用低、 無污染等優點。 然而，該種檢測方法也存在操作步驟多而繁瑣，操作時間較長， 影響因素多等缺陷。且這種檢查方式的不足還有初篩弱陽性在復查時可能為陰性，重復性較差。CLIA法是通過化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法，可多次重復檢查，靈敏度高。其作用原理，是以磁微粒為固相載體，利用多重磁分離技術，結合游離部分高效分離，磁微粒增大反應面積及加快反應，保證發光強度及時間，因而有助于提升檢測準確性^[7]。CLIA法借助發光底物自身發光強度進行指標測定，具有極高的的靈敏度，能夠顯著降低臨床漏診及誤診情況。且該檢查方式對于灰區有較好的檢驗效果，可客觀的判斷灰區情況，因而對疾病的診斷價值顯著。具有更加寬廣的線性范圍， 主要對乙肝病毒進行定量檢測，在臨床實驗室檢測中應用極為廣泛。

綜上所述，與 ELISA檢測法相比，CLIA法在乙肝病毒感染血清標志物檢測中，可對病毒標志物進行定量分析，相比ELISA法定性分析對乙肝病毒血清標志物的檢出率更高。用化學發光法檢測乙肝兩對半具有靈敏度高，重復性好，特異性強，準確性佳，檢測快速，應積極推廣使用，以便讓醫生能夠對乙肝患者的病程、治療、預后和病情療效作出合理的解釋提供依據。

參考文獻：

[1]謝曉婷,梁健夫.不同免疫檢測法在乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測中的應用[J].中國民間療法,2019,27(23):75-76.

[2]宋興麗.不同免疫檢驗方法對乙型肝炎病毒感染血清學標志物的檢測效果比較[J].抗感染藥學,2019,16(1):90-92.

[3]龍潤,郭虹憶,楊靜.柴苓湯對慢性乙型肝炎病毒感染不同階段細胞免疫及病毒清除的影響[J].中華中醫藥學刊,2019,37(4):985-988.

[4]王得權.血清免疫學指標在慢性HBV感染檢測中的應用[J].河南預防醫學雜志,2019,30(1):57-58+77.

[5]張玲、鄭榮、何三軍、魏少軍、唐寒秋、馮仕川.慢性乙型肝炎患者HBV-DNA載量,肝功能指標與免疫學標志物的相關性研究[J].檢驗醫學與臨床,2020,v.17(22):122-124.

[6]吳志東,方偉禎.乙型肝炎病毒慢性感染的臨床免疫學檢測的重要性[J].深圳中西醫結合雜志,2019,29(4):77-79.

[7] Cs A ,   Fs A ,   Ska B . Performance evaluation of nine different syphilis serological tests in comparison with the FTA-abs test[J]. Journal of Immunological Methods, 2019, 464:9-14.